Bishops oprindelse afslører, hvorfor hun hader mutanter, hemmeligheden bag Mechazoiderne og, hvad der skete den nat, skildpadderne faldt i hendes fælde.
De heroiske, pizzaelskende skildpaddebrødre Leo, Mikey, Raph og Donnie skal lære at finde deres individuelle styrker og arbejde med gamle allierede for at klare både teenagelivet og besejre nye skurke, der lurer i New York Citys skygger.